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红细胞保存液的技术特点

2013-11-05 19:10:07 华晨阳 www.bobbykray.com 点击数:
关键字: 细胞保存液
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红细胞保存液的技术特点

1. 产品型号/规格及其划分说明 1.1 规格    1.2 组成成分及装量  表1  宫颈脱落细胞保存液主要组成成分 

试剂 含量 三羟甲基氨基甲烷 10 mmol/L 乙二胺四乙酸 1 mmol/L 乙基苯基聚乙二醇  0.02% 氯化钠  0.06%  配制完毕后,调节pH值至8.0(±0.2)。 2. 性能指标 2.1 外观  细胞保存液内容物为清亮液体,无色、无絮状纤维、颗粒杂质,振荡可产生白色泡沫。 2.2 pH值  在25℃下,测试细胞保存液的pH值,应为8.0±0.2。 2.3 细胞保存效果  2.3.1 将人体细胞株悬液加到细胞保存液中,提取DNA,PCR扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测,应有效检出人β球蛋白基因(250bp),且条带位置正确,无HPV基因检出。  2.3.2  将插入HPV18型L1基因的Hela细胞悬液加到细胞保存液中,提取DNA,PCR扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测,应有效检出人β球蛋白基因(250bp)和HPV基因(450bp),且条带位置正确。 2.4 批间差 

 

- 2 -    三个批次细胞保存液的pH应≤0.3。 3. 检验方法 3.1 外观  目测外观,应符合2.1的要求。 3.2 pH值  在25℃下用pH计测定细胞保存液的pH值,应符合2.2的要求。 3.3 细胞保存效果  3.3.1 将人体细胞株悬液加到细胞保存液中,使其终浓度为50个细胞/μL,提取保存液中DNA,使用β球蛋白基因引物和HPV通用引物MY09/11扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示为有效检出人β球蛋白基因(250bp),且条带位置正确,无HPV基因检出,符合2.3.1的要求。  3.3.2  将插入HPV18型L1基因的Hela细胞悬液加到细胞保存液中,使其终浓度为50个细胞/μL,提取保存液中DNA,使用β球蛋白基因引物和HPV通用引物MY09/11扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示为有效检出人β球蛋白基因(250bp)和HPV基因(450bp),且条带位置正确,符合2.3.2的要求。 3.4 批间差  抽取三个批次的细胞保存液,25℃下,分别用pH计测定其pH值,计算最大pH值与最小pH值之差,即ΔpH,应符合2.4的要求。

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